一、终点OD检测本身的检测短板

1. OD依靠培养液透光程度间接推算微生物总量，只能够识别悬浮于上层液体当中的菌体。天然产物经常会诱发细菌聚集、菌丝贴壁沉淀，活菌附着在微孔底部，上清液浑浊度很低，OD数值显示生长受到抑制，实际孔底存活大量活菌，或是反过来上清菌体稀少、底部生物膜增殖旺盛，单一吸光度无法反映整体活菌数量。

2. 终点OD仅采集单个时间节点的数据，缺失微生物完整生长阶段信息。天然提取物最常见的作用为延长生长迟滞期，只是推迟菌体萌发以及增殖速度。到达终点检测时刻微生物还处在停滞阶段，研究者判定物质具备抑菌活性；或是迟滞期过后菌体开始复苏增殖，取样时间过早便会错过后期生长，造成活性漏判。

二、天然产物独有的特性造成漏判

1. 抑制靶点偏向孢子萌发、芽管延伸

很多植物类天然抑菌物质主要作用于真菌孢子萌发阶段，仅延缓芽管长出，并不会彻底阻止后续菌丝生长。等到终点检测的时候菌丝已经发育成熟，培养液出现浑浊，OD结果显示没有抑制效果，萌发阶段的抑制效果直接被忽略。

2. 存在浓度‑时间依赖性的迟滞型抑菌

亚‑MIC浓度的天然产物不会直接杀死菌体，只会拉长菌体适应时长。短时间终点读数看不出区别，经过长时间培育之后才会显现出明显的生长差距。固定时长的OD检测容易漏掉这类亚抑制活性。

3. 提取物内颗粒物、色素干扰吸光度读数

粗提物自带悬浮碎屑、有色物质，会干扰OD数值。部分组别菌体已经被抑制，但是固体颗粒让吸光度升高；或是菌体正常增殖，色素降低透光率，两种情况都会干扰判断，使得真实的抑菌活性被掩盖。

三、微生物形态畸变引发终点OD漏检

部分天然成分能够促使细菌丝状拉长、菌丝顶端膨大变形。拉长之后的单细胞会提升溶液浊度，OD检测误认为微生物大量繁殖，实际菌体分裂增殖已经遭到抑制，单纯依靠吸光度便会漏掉该种抑菌表现。

四、菌群异质性带来的检测局限

天然产物胁迫之下微生物菌群分化为敏感亚群以及耐受亚群，敏感菌体被抑制，少数耐受菌株缓慢增殖。终点OD只要出现浑浊就判定无抑菌效果，忽略大部分菌群长时间受到抑制，仅有小部分耐受菌体后期复苏的现象。