审稿人主要疑问：丝状真菌菌丝缠绕、结球、沉降、贴壁会造成微孔浊度OD检测波动大、重复性差、数值失真，为何舍弃常规比浊法，将oCelloScope原位成像观测数据作为核心评价指标。应答分为返修英文回信、论文正文注释、答辩口头解释三种版本，先承认丝状真菌浊度检测固有缺陷，再阐述成像表征的科学性、指标量化逻辑、数据稳定性，证明显微成像相比OD浊度更适配丝状真菌生长定量与形态解析。

二、返修信正式英文答复（直接用于Response to Reviewers）

We fully agree with the reviewer’s comment that conventional turbidity (OD value) detection has obvious defects for filamentous fungi detection. The hyphal aggregation, pellet formation, sedimentation and wall adhesion of filamentous fungi will cause irregular changes in light transmission, resulting in poor repeatability and deviation of OD turbidity data, which cannot truly reflect the actual biomass and morphological characteristics of fungi. Therefore, this study adopts the in-situ continuous imaging function of oCelloScope as the main characterization method. The system relies on full-field microscopic shooting to quantify hyphal area, pellet diameter, mycelial coverage rate and spore germination ratio, realizing direct visualization and digital quantification of fungal growth state. Compared with indirect turbidity calculation, imaging data avoids the interference of mycelial agglomeration on optical signals, with higher accuracy and repeatability. The imaging quantitative parameters have been listed as core experimental data in the manuscript to support the research conclusion.

三、论文正文方法段补充说明

丝状真菌菌丝易团聚成球、沉降堆积，常规微孔板浊度（OD）检测受菌体分布形态干扰严重，检测数值稳定性差，难以实现精准定量。本研究采用oCelloScope高通量原位显微成像系统开展培养全过程记录，通过图像算法分割统计菌丝覆盖面积、菌球粒径分布、萌发菌丝占比等直观量化指标，以成像解析数据作为丝状真菌生长、形态发育、抗逆特性评价的主要依据，规避浊度检测的形态干扰误差，实现丝状真菌生长状态可视化与精准量化表征。

四、答辩精简口语话术

1. 丝状真菌形成菌丝球之后，浊度数值忽高忽低属于固有缺陷，OD只能做粗略参考，不适合作为核心定量数据。

2. oCelloScope可以直接拍摄微孔内部菌体真实形态，依靠图像计算菌丝面积、菌球大小，属于直接观测，数据可信度更高。

3. 成像可以同时拿到生长量与微观形态两类数据，既能定量生长强弱，又能解析菌丝发育特征，是丝状真菌研究更适配的检测手段。

五、论证强化要点

1. 指标差异化对比：OD是间接光学信号，成像为直接形态像素量化，根源上规避菌体团聚带来的系统误差。

2. 多维数据优势：除生长定量外，成像可同步获取菌球密实度、分支程度、生物膜形成特征，是浊度检测无法实现的。

3. 对照佐证：可搭配终点菌丝干重做相关性验证，证明成像量化指标与实际生物量具备良好线性关系。

六、表述禁忌

1. 不要否定浊度的基础作用，表述为OD仅作为辅助参考指标；

2. 不夸大成像优势，客观说明成像适配丝状真菌形态复杂的独有场景；

3. 清晰标注图像量化算法来源，提升数据可信度。