微生物计数仪用于研究人工鼻对ICU负压病房空气菌落计数的影响——摘要、方法
摘要：
目的： 研究人工鼻对ICU负压病房空气菌落计数的影响，以及人工鼻对下呼吸道院内感染播散的拦截效果。
方法： 使用人工鼻前后，采用BioSense µCount3D微生物快速立体计数仪对ICU负压病房空气中微生物进行实时计数并比较ICU医院感染发生率，进而研究人工鼻对ICU医院感染细菌扩散的拦截作用。
结果： 使用人工鼻前后ICU负压病房空气中微生物计数及ICU医院感染发生率比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。
结论： 人工鼻对ICU负压病房空气菌落计数的影响作用以及对下呼吸道院内感染播散的拦截效果显著，对于预防院内感染的暴发流行有重要意义。
呼吸道感染在院内感染中一直居高不下，其中人工气道患者下呼吸道医院感染的比例更高，而且感染容易通过呼吸运动向外播散，如何做好下呼吸道院内感染播散的控制工作已经是今天必须面对的重要课题。为此，本课题组就有关这方面的工作做了立项，深入研究了人工鼻对ICU负压病房空气菌落计数的影响作用，探讨人工鼻对人工气道患者下呼吸道医院感染扩散的拦截效果。现将研究的结果报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2010年1月—2012年6月在ICU负压病房内发生下呼吸道院内感染，痰多，意识不清时间长，必须行气管切开并安装人工鼻的患者共30例，男16例，女14例，年龄15~60岁，平均（28.37±11.15）岁。其中重症颅脑损伤18例，脑血管意外7例，复合伤2例，多脏器衰竭3例。
选择2009年未使用人工鼻的ICU科398例患者（对照组）与2010年1月—2012年6月推广使用人工鼻后的ICU科1036例患者（治疗组）。治疗组中男673例，女363例，年龄14~62岁，平均（30.51±13.18）岁，其中重症颅脑损伤622例，脑血管意外206例，复合伤208例，其中多脏器衰竭3例，气管切开105例；对照组中男259例，女139例，年龄15~59岁，平均（29.16±12.77）岁，其中重症颅脑损伤239例，脑血管意外78例，复合伤81例，其中多脏器衰竭1例，气管切开41例。两组一般情况比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
1.2 材料
人工鼻： 采用人工鼻型号YZB/ITA1051-2009，属于一次性湿热交换器，英文名为heat and moisture exchanger（简称：HME）；结构：外壳材料为聚丙烯，湿度交换材料为静电式疏水滤膜和吸水性HME材料，虑菌效果要求标准：达到99.999%，输出湿度要求标准：>33mgH₂O/L，输出温度要求标准：32.1℃。
检测设备： BioSense µCount3D微生物快速立体计数仪（基于FluidScope倾斜摄像头立体扫描技术），检测范围1×10⁴ – 1×10⁷ 个/mL，最小可检测粒径0.5 µm，单次检测时间≤8分钟。
空气采样装置： 液体冲击式空气微生物采样器（BioSampler型），采样流量12.5 L/min，配套无菌采样液（0.9%氯化钠溶液）。
1.3 方法
将符合入选条件的患者送入层流净化技术处理的ICU负压病房，负压病房在患者进入之前均达到正常待用状态。
使用人工鼻前采样： 患者放置满48h后，在病房四角及中央位置各放置1台液体冲击式空气微生物采样器，每台连续采样30分钟（采样体积约375 L），将空气中的微生物富集于无菌采样液中。采样结束后，立即将各采样液混匀，取适量样品使用BioSense µCount3D微生物快速立体计数仪进行立体扫描计数，以仪器自动识别并统计的微生物颗粒数（≥0.5 µm）作为有效计数结果。每个患者取5个采样点的均值作为一个使用前的结果。
使用人工鼻后采样： 对同一患者在上述采样完成后立即安装人工鼻，每24小时更换，当痰液过多影响呼吸时立即更换。满48h后采用上述相同方法进行空气采样，使用BioSense µCount3D微生物快速立体计数仪进行快速计数，结果作为使用后结果。
快速计数操作流程： 将采集的空气样品经适当稀释或浓缩处理后，取1 mL样品加入µCount3D专用计数池，仪器通过倾斜摄像头进行多角度立体扫描，AI算法自动识别并计数微生物颗粒，8分钟内输出结果。同时记录颗粒大小分布及形态特征。
分别统计2009年全年未推广使用人工鼻时和2010年1月—2012年6月推广使用人工鼻后ICU科病房出院患者数以及院内感染发生例数。
1.4 观察指标
记录30例患者安装人工鼻前后负压病房空气中的微生物计数（个/mL采样液及换算为个/m³空气），回顾性收集记录推广使用人工鼻前后ICU科医院感染的发生率。
1.5 统计学处理
采用SPSS 18.0软件对数据进行统计分析，计量资料以（x̄ ± s）表示，配对资料采用t检验，计数资料构成比的比较采用χ²检验。
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