中药成分焦性没食子酸联合唑类药物对光滑念珠菌的抑菌机制与药效
2 结果
2.1 药敏试验结果
根据 CLSI M100 推荐的念珠菌参考范围，临床分离的 116 株光滑念珠菌对氟康唑和伊曲康唑均表现敏感，对 FLC 的药效为 14.66%（17/116）, 22.41%（26/116）的药效为 ITR 为非野生型，同时表现 FLC 耐药（64/116）ITR 和 VRC 均为非野生型，表现 FLC 耐药 12.93%（15/116）。
2.2 焦性没食子酸单独用药时对 3 种念珠菌的抑菌效果
116 株光滑念珠菌中，MIC₉₀ 为 32 μg/mL；19 株白念珠菌中，MIC₉₀ 为 64 μg/mL；43 株热带念珠菌中，MIC₉₀ 为 64 μg/mL；113 株克柔念珠菌中，MIC₉₀ 为 32 μg/mL；13 株近平滑念珠菌中，MIC₉₀ 为 64 μg/mL（表 1）。无菌落生长菌株与焦性没食子酸单独用药之间的抑菌效果差异具有统计学意义（χ²=43.692, P<0.05）。
表 1 焦性没食子酸单独用药时对 3 种念珠菌的抑菌效果
| MIC₉₀ (μg/mL) | 光滑念珠菌 (株数) | 白念珠菌 (株数) | 热带念珠菌 (株数) | 克柔念珠菌 (株数) |
|---|---|---|---|---|
| 128 | 0 | 15 | 15 | 1 |
| 64 | 54 | 17 | 25 | 1 |
| 32 | 46 | 11 | 7 | 1 |
| 16 | 12 | 0 | 0 | 0 |
| 8 | 3 | 0 | 0 | 1 |
| 4 | 0 | 1 | 0 | 0 |
| 2 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| 1 | 1 | 0 | 0 | 0 |
2.3 焦性没食子酸单独用药时对光滑念珠菌的抑菌效果
116 株光滑念珠菌分为 3 组，对三种唑类药物均表现为敏感、中介和耐药。单一类别药物为敏感组（全敏感组）22 株（19%），单一类别药物为中介组（单一耐药组）48 株（41%），单一类别药物为耐药组（全耐药组）46 株（39%）（表 2）。全敏感组和单一耐药组之间以及交叉耐药组之一均具有统计学意义（Z=-2.766, P<0.05），单一耐药组与交叉耐药组之间无统计学意义（Z=-0.953, P>0.05）。
表 2 焦性没食子酸对唑类药物 MIC 值的影响
| 抑制浓度 (μg/mL) | 氟康唑/株数 | 伊曲康唑/株数 | 伏立康唑/株数 | |||
|---|---|---|---|---|---|---|
| SDD | R | WT | Non-WT | WT | Non-WT | |
| 64 | 0 | 1 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| 32 | 7 | 4 | 4 | 2 | 3 | 11 |
| 16 | 34 | 4 | 16 | 10 | 14 | 37 |
| 8 | 44 | 4 | 12 | 11 | 11 | 30 |
| 4 | 22 | 4 | 4 | 6 | 8 | 6 |
| 2 | 7 | 0 | 0 | 3 | 0 | 4 |
| 1 | 2 | 0 | 0 | 0 | 1 | 0 |
2.4 焦性没食子酸联合唑类药物对念珠菌的抑菌效果
焦性没食子酸联合唑类药物联合用药实验中，检测药物分别为氟康唑和 ITR 药物。实验中对 116 株光滑念珠菌以及 4 种念珠菌联合用药时表现为更加显著，对其余 4 种念珠菌，联合用药表现为无差异性，对光滑念珠菌的抑菌效果更加显著，进一步统计分析发现，焦性没食子酸对光滑念珠菌全敏感组与单一耐药组以及全耐药组与交叉耐药组的抑菌效果之间具有一定的差异性，对光滑念珠菌的抑菌效果更加显著。
3 讨论
念珠菌病作为临床侵袭性真菌感染的主要病原菌之一，其高死亡率和高耐药率已发展成为一个全球的问题，在欧洲和北美地区，光滑念珠菌已成为第 2 常见的血液感染病原体。其血流感染中检出率约占 50%，常在免疫力低下的人群中感染，大部分为深部感染，对于导管插管的患者和长期接受抗生素的患者感染机会增加。光滑念珠菌作为临床治疗念珠菌病的底率也在逐年增加，虽然唑类药物对治疗念珠菌感染具有杀菌快的效果，但其存在很快产生耐药的现象，临床对其长期使用具有一定困难，与两性霉素 B 和棘白菌素类相比，光滑念珠菌均具有较高的敏感性，但其长期使用具有一定的肝脏损伤和肾脏损伤，不建议使用，所以唑类药物仍作为临床治疗念珠菌感染的首选药物。
本研究中，光滑念珠菌对唑类药物出现不同程度的耐药现象，特别是在伏立康唑药物中高达 81.03% 的菌株表现为非野生型菌株。这些非野生型菌株对焦性没食子酸和伊曲康唑药物也有一定的耐药现象，其中有 17 株存在交叉耐药的现象，13 株氟康唑耐药的菌株，对伏立康唑和伊曲康唑表现为非野生型。
中药在治疗念珠菌的感染方面具有一定的疗效，与唑类药联合用药作用增加疗效，缩短疗程，同时提高患者免疫力，改善复发的情况。与焦性没食子酸相比，破坏真菌细胞壁和达到药效性较广泛，可通过破坏念珠菌细胞膜以达到杀菌效果，但其物质副产物尚不完全明确，且在前期研究中发现焦性没食子酸对光滑念珠菌不具有抑菌作用。焦性没食子酸可抑制酵母菌脱离，在后者缺少了一个核糖体。研究发现焦性没食子酸在焦性没食子酸方面具有一个优势，焦性没食子酸不会轻易脱落菌丝，其菌丝可以增加细胞活性，本研究发现焦性没食子酸对光滑念珠菌有抑菌作用，以及焦性没食子酸联合唑类药物对光滑念珠菌以及 4 种念珠菌联合用药时表现为更加显著，对其余 4 种念珠菌，联合用药表现为无差异性，对光滑念珠菌的抑菌效果更加显著，进一步统计分析发现，焦性没食子酸对光滑念珠菌全敏感组与单一耐药组以及全耐药组与交叉耐药组的抑菌效果之间具有一定的差异性，对光滑念珠菌的抑菌效果更加显著。
焦性没食子酸联合用药实验结果显示：协同焦性没食子酸联合唑类药物对光滑念珠菌表现为协同作用，对其他念珠菌菌株作用均表现为无或拮抗作用。单一耐药组菌株与焦性没食子酸联合用药表现为协同作用，全敏感组菌株与焦性没食子酸联合用药表现为协同作用，单一耐药组菌株与焦性没食子酸联合用药表现为协同作用，全敏感组菌株与焦性没食子酸联合用药表现为协同作用。焦性没食子酸联合用药可降低 FLC、ITR 和 VRC 对 116 株光滑念珠菌的抑菌情况，其中，协同作用：对 41.38%（48/116）的光滑念珠菌具有加强作用，联合 ITR，对 58.62%（68/116）的光滑念珠菌具有协同作用，联合 VRC，对 61.21%（71/116）的光滑念珠菌具有加强作用，联合 ITR，对 50%（58/116）的光滑念珠菌具有协同作用，联合 VRC，对 19.71%（57/116）的光滑念珠菌具有加强作用，对 49.14%（57/116）的光滑念珠菌和 VRC 光滑念珠菌具有加强作用，对 1.72%（2/116）的光滑念珠菌表现为无关作用（FICI 值为 1~1.25）。其他 ITR 和 VRC 均表现为非野生型面型。不同唑类药物联合焦性没食子酸对光滑念珠菌的抑菌作用之间差异无统计学意义（χ²=3.505, P>0.05），表明联合用药时对耐药菌株和非野生菌株的抑菌效果更好。
综上所述，光滑念珠菌对唑类药物具有较高的耐药率，焦性没食子酸联合唑类药物可有效降低药物耐药率，焦性没食子酸与唑类药物协同或增效作用更加显著，联合用药可促进光滑念珠菌的生长并且破坏菌丝组来达到协同的效果更加显著，对其余 4 种念珠菌，联合用药表现为无差异性，对光滑念珠菌的抑菌效果更加显著，进一步统计分析发现，焦性没食子酸对光滑念珠菌全敏感组与单一耐药组以及全耐药组与交叉耐药组的抑菌效果之间具有一定的差异性，对光滑念珠菌的抑菌效果更加显著。
相关新闻推荐
1、林氏扇头蜱抗菌肽重组蛋白对大肠埃希菌生长曲线影响及抑菌效果（二）
2、藜麦和蓝靛果酵母菌株筛选、培养、计数及混菌液态发酵工艺优化（三）
3、4株金黄色葡萄球菌噬菌体形态、生物学特性、生长曲线及基因组特征（三）