对虾养殖池水中叶绿素a浓度和微藻种类优势度指数及均匀度（上）
摘要
不同养殖时间，采集广西北海市3口凡纳滨对虾[Litopenaeus vannamei]养殖池塘水样，调查养殖水中叶绿素a浓度和微藻组成。叶绿素a浓度用分光光度三波长法测定，微藻分类计数用镜检法进行，微藻多样性分析用Shannon-Wiener多样性指数、Pielou种类均匀度指数和种类优势度指数进行。结果表明，3口池塘叶绿素a的浓度养殖前期低，在10.0μg/L以内，养殖中期增长迅速，养殖后期达到150.0μg/L;微藻细胞密度在养殖前期低于20x106 cells/L，养殖后期高于100x106 cells/L;微藻多样性指数和均匀度指数皆为养殖前期高，养殖中后期逐渐降低，多样性指数0.98~3.15，均匀度指数0.28~0.82;在养殖前期，微藻的种类较多，优势种是硅藻和绿藻，养殖中后期种类减少，优势种是绿藻、蓝藻和甲藻。
1.材料和方法
水生态系统的生产者，决定着特定水域的生产性能。水中藻类的种类和数量影响池塘水质，也影响养殖动物的健康。叶绿素a是植物进行光合作用时吸收和传递光能的主要物质，叶绿素a含量的高低可以反映水体内浮游植物生物量的多寡。广西北海地区是我国华南对虾主产区之一，对这一地区对虾养殖池塘叶绿素a和水体理化因子的研究有一些报道，但是关于叶绿素a和微藻组成变化的研究不多。本文研究北海市大墩海村3口凡纳滨对虾养殖池塘叶绿素a浓度和微型藻[微藻]组成，以期为科学调控水质，预防虾病发生，增加对虾产量和提升对虾品质，提供指导依据。
1.1虾塘概况
以北海市大墩海村3口凡纳滨对虾[Litopenaeus vannamei]养殖池塘[虾塘编号为1号、2号、3号]为研究对象，虾塘四周为水泥护坡，底部铺设塑料薄膜，1~3号池塘的面积分别为0.67 hm²、0.95 hm²、0.88 hm²，3口池塘深1.8m，有效水深1.2~1.5m。每个池塘配备3台1.5kW的水车式增氧机，每天早晚各开启4h。养殖用水为近海纳潮海水，经80目筛绢锥形网袋过滤后用于养殖。对虾放养密度为45万尾/公顷，养殖期间投喂全价配合饲料。
1.2样品采集和分析
2006年从7月11日虾苗投苗至10月19日收虾，约每10天到上述池塘采样1次，采样时间为上午9:00～10:00。采样时，在池塘4个角和中间各取距水面0.5m水层处的水1000ml，混合后进行分析。现场监测记录水温、水色、盐度、pH值。盐度用比重计测量后换算，pH值用便携式pH计测量。叶绿素a的测量依据文献的分光光度三波长法，取500ml水样，用孔径为0.45μm的醋酸纤维素滤膜进行减压抽滤。将滤膜放入15ml具塞离心管，加入90%的丙酮溶液10ml，用涡旋混合仪使其充分振荡，于冰箱内提取24 h，在4000 r/min下冷冻离心10 min，吸取上清液并加入1cm比色血中，用分光光度计测定750 nm、664 nm、647 nm和630 nm处的吸光度，以90%丙酮溶液作为参比，用以下公式计算叶绿素a的浓度。
式中，rho_{Chl-a}为叶绿素a的浓度，v为提取液体积，V为水样品实际用量，L为测定池光程。
微藻分类计数采用镜检法。取1000 ml水样并加5%体积的甲醛溶液固定，静置沉淀并浓缩后，用0.1ml浮游植物计数框，在显微镜下计数分类。多样性分析采用Shannon-Wiener多样性指数H^{prime}、Pielou种类均匀度指数J和种类优势度指数Y进行，计算公式如下:
式中，n_i为第i种类个体数，N为总个体数，f_i为该种的出现频率，S为种类数，P_i为i种所占比例，优势度指数Y大于0.02的种类为优势种。
2.结果与分析
2.1温度、盐度及pH值的变化
从投虾苗至收虾，3口池塘的水温、盐度、pH值变化皆比较平缓，变化相似。由于正值高温时节，水温基本维持在28~30°C之间，10月份稍降至25°C左右。盐度为14.15%~23.55%，养殖前期[7月11日～8月10日]与后期[9月29日～10月19日)皆大于16.8%，中期[8月19日～9月19日]降至14%左右，这是受台风和暴雨短暂影响所致。pH值皆大于8.0，多为8.1~8.8。
2.2叶绿素a浓度变化
3口池塘的叶绿素a的浓度养殖前期低，中后期高。在养殖开始的1个月内，叶绿素a的浓度在10.0μg/L以下，中期迅速增长，后期达到150.0μg/L左右，但是3口池塘的变化情况并不完全相同。1号池塘的最高值是10月10日的157.7μg/L，次高值是9月19日的148.8μg/L，后期浓度高而且变化幅度大，至收虾时降至59.3μg/L;2号池塘的次高值是9月19日的103.5μg/L，其后降低，又逐渐升高，至收虾时达到最高值116.2μg/L;3号池塘的叶绿素a浓度则是随着养殖时间的推移而逐步升高，至收虾时达到最高值143.5μg/L，次高值是10月10日的91.4μg/L。
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