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​酵母菌生长周期及生长曲线测定操作步骤

来源:食品安全导刊 发布时间:2024-07-15 23:20:52 浏览:320 次

酵母菌生长曲线测定操作步骤


(1)酵母菌活化。在无菌条件下,将1%酵母粉末加入灭菌后的5%葡萄糖溶液中。置于28℃摇床中振荡培养(转速200 r·min-1)活化3 h。


(2)酵母菌的YEPD液体培养。按1%比例将酵母菌液转移到新培养基中,置于28℃摇床振荡培养(转速200 r·min-1)5 h,将酵母培养至对数期,可冷藏保存。


(3)酵母菌的生长曲线。从摇晃均匀后的酵母菌YEPD液体培养基中无菌取出菌液,加入到灭菌过的新鲜YEPD液体培养基中,每间隔2 h测定吸光度数值,最终测得24 h的吸光度,用稀释后的混合液吸光度乘以相应的稀释倍数得吸光度数值。以接种后0 h、2 h、4 h、6 h、8 h、10 h、12 h、14 h、16 h、18 h、20 h、22 h和24 h为横坐标,以吸光度乘以相应稀释倍数为纵坐标,最终绘制出酵母细胞24 h的生长曲线。


结果


酵母菌的生长曲线


单细胞微生物的生长过程通常分为4个阶段,即适应期、对数期、稳定期和衰亡期。由图1知,酵母菌的生长曲线清晰地反映了酵母菌的4个生长阶段,初始阶段0~5 h为酵母菌生长的迟滞期;5~14 h的生长曲线呈大幅上升趋势,酵母菌经过短暂的适应期后快速生长,开始大量繁殖,发酵速度明显加快,菌种数量增多,说明酵母菌进入了生长对数期;14~22 h产生大量的次生代谢产物使得pH值下降,酵母菌生长环境恶劣,此时生长速度下降,酵母细胞的对数生长阶段结束进入稳定生长阶段,活菌数目变化不大,培养22 h后酵母菌的数量达到峰值。22 h以后,酵母菌的生长呈缓慢的下降趋势,是酵母菌生长的衰亡期。

图1酵母菌的生长曲线


综上可知,此高活性酵母的对数期在5~14 h。在酵母细胞稳定期,酵母细胞的生长速率和死亡速率达到基本平衡,此时酵母细胞的总体个数保持基本不变,所以不适合测定。而在对数生长期酵母的生长速率远远大于死亡速率,以最快速度进行繁殖,此时的酵母菌细胞活性旺盛,细胞个体形态及生理指标都较为稳定,所以本实验选取酵母为对数期酵母。


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