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药物检测:目标生长曲线确定孵育孔中对应的浓度梯度

目前,通过透射光强的变化模拟细菌生长状态的变化,从而判断孵育孔内药物是否具有杀菌或抑菌效果。


但是将细菌样本加入药敏板多个孵育孔内,由于药敏板中每个孵育孔本体透光率不同从而引入误差,再加上光学系统也不是同一个系统,会引入光强值读取误差;因此,会导致细菌样本在多个孔内的生长状态接近,但是由于上述两个原因叠加的误差,也会得相差较大的透射光强数据,对于仪器的判读标准的制定是非常不利的,从而影响了药敏测试的准确性。


因此,亟需一种药敏检测方法,能够有效提高药敏测试的准确性。


药敏检测方法包括以下步骤:

获取药敏板各孵育孔的初始透射光强值,各所述孵育孔内有不同种类和/或不同浓度梯度的药物。


应理解的是,在获取药敏板各孵育孔的初始透射光强值之前,还包括将细菌样本和培养基接种于药敏板的多个孵育孔。


在具体实现中,可以从待测临床样品平板上挑取单菌落作为细菌样本;将所述细菌样本接种于培养基中获得培养基混合液,并将所述培养基混合液接种于药敏板的多个孵育孔。


需要说明的是,将细菌样本和培养基接种于药敏板的多个孵育孔可以是通过人工操作的方式、独立装置点样的方式或集成式点样的方式,也可以是其他接种方式,本实施例对此不加以限制。


需要说明的是,细菌等微生物感染会引发多种疾病,不仅发病率高而且经常引发危重症,严重危害人类健康和生命。因此,研究各类微生物感染疾病对应浓度梯度的抑菌或杀菌药物是临床医学领域的重要问题。


可理解的是,在相关技术中,针对细菌等微生物的检测任务包括有临床药敏检测,临床药敏检测是为了检测抗菌药物的MIC(MinimumInhibitoryConcentration,最低抑菌浓度)值,该数据有助于改善患者的预后和防止耐药性微生物菌株的演变。确定最低抑菌浓度值,需要对微生物进行准确有效的计数。以细菌为例,传统的细菌计数方法包括比浊法、菌落计数法、计数器测定法等。


其中,比浊法是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量,细菌悬浮液的浓度在一定范围内于透光度成反比,与光密度成正比,此方法简单快捷。本实施例就是通过透射光强的变化模拟细菌等微生物的生长状态的变化,从而判断孵育孔内对应浓度梯度的药物是否具有杀菌或抑菌效果,从而指导用药。


应理解的是,上述药敏板是用来做药敏实验或者抗菌实验的琼脂平板。


在具体实现中,可以从待测临床样品平板上挑取单菌落作为细菌样本;将所述细菌样本接种于培养基中获得培养基混合液,并将所述培养基混合液接种于药敏板的多个孵育孔,所述孵育孔内有不同种类和不同浓度梯度的药物。


需要说明的是,所述培养基选自BBL(美国BD公司)、Difco(美国BD公司)、Mueller-Hinton Broth(英国Oxoid公司)和Iso Sensitest肉汤(英国Oxoid公司)中的至少一种。


所述培养基具体为2×BBL培养基(美国BD公司)、2×Difco(美国BD公司)、2×Mueller-Hinton Broth(英国Oxoid公司)和2×Iso Sensitest肉汤(英国Oxoid公司)中的至少一种。


在现有技术中将细菌样本加入药敏板多个孵育孔内,每个孵育孔本体透光率不同引入误差,再加上光学系统也不是同一个系统,也引入光强值读取误差;即便细菌样本在多个孵育孔内生长状态接近,由于以上两个原因叠加的误差,也会得相差较大的透射光强数据。


例如,以两个孔对应两套光学系统为例,假设两个孔的透光率分别为0.8,0.4,两套光学系统原始光强分别为1000,800;孵育孔内待检测液的透光率4个时刻的变化值为0.9、0.8、0.6、0.3;那么对应第一组孔与第一套光学系统得到的光强值变化为1000*0.8*0.9=720、1000*0.8*0.8=640、1000*0.8*0.6=480、1000*0.8*0.3=240;对应第二组孔与第二套光学系统得到的光强变化为800*0.4*0.9=288、800*0.4*0.8=256、800*0.4*0.6=192、800*0.4*0.3=96。根据上述两组数据同样的样本生长趋势,得到了两个完全不同的生长曲线,对于仪器的判读标准的制定是非常不利的,从而影响了药敏测试的准确性。


目标生长曲线;基于各所述目标生长曲线确定各所述孵育孔中对应的浓度梯度的药物的效果。由于本实施例将药敏板放入孵育系统后,在预设时间内基于第二时间间隔依次获取各孵育孔的透射光强值;根据各透射光强值确定各孵育孔的初始透射光强值,初始透射光强值为所述透射光强值的最大值、最小值或平均值;然后基于各所述孵育孔对应的初始透射光强值和对照透射光强值,通过预设操作生成细菌样本的目标生长曲线,最后基于各目标生长曲线确定各孵育孔中对应的浓度梯度的药物的效果,相比于现有技术,本实施例可以有效降低检测过程中偶然性带来的偏差,进一步提高了药敏检测的准确性。


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