牦牛源多杀性巴氏杆菌C47-8株体外生长曲线的测定结果
牦牛出血性败血症是由多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida，P.multocida）引起的牦牛的一种以高热、肺炎、间或呈现急性胃肠炎以及内脏器官广泛出血为特征的急性传染病，被列为青海省重点防控的疫病之一。
根据GenBanK中发表的多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida，P.multocida）HN06株（登录号为NC017027）的ompH核苷酸序列设计合成一对特异性引物，将PCR扩增获得的牦牛源P.multocida C47-8的ompH基因片段连接到pMR10载体上，构建了C47-8株ΔompH缺失株互补质粒pMR10-ΔompH，并将该质粒电转化至C47-8ΔompH缺失株中，成功获得其互补菌株。
在此基础上，对C47-8亲本株、ΔompH缺失株以及互补株的生物学特性进行研究。形态学观察结果表明，3株菌的生长形态无差异；生化试验结果表明，除了缺失株发酵蕈糖、硝酸盐试验呈现阳性外，3株菌的其余生化特性未发生改变；体外生长曲线表明亲本株C47-8的生长速度比缺失株和互补株的生长速度慢，说明ompH基因对C47-8的生长有显著影响。本试验为深入研究P.multocida的致病机制以及研制安全有效的基因缺失减毒活疫苗奠定了基础。
体外生长曲线的测定按文献的方法测定3个菌株的OD600值，绘制细菌体外生长曲线，每个菌株做3个重复，用SPSS19.0软件进行分析，并根据生长曲线测定出细菌的代时。
体外生长曲线的测定将P.multocida菌液每隔1 h测定3次OD600值，将得到的数据用SPSS19.0软件进行统计学分析，并绘制体外生长曲线，结果见下图。
C47-8亲本株、缺失株和互补株体外生长曲线的测定结果
从图可知，亲本株生长速度较慢，而缺失株和互补株则生长速度较快，由此可以确定ompH基因明显影响了C47-8的生长。
根据生长曲线测定出细菌的代时（G）C47-8亲本株代时为1.248 h，缺失株为0.727 h，互补株为0.765 h。表明C47-8亲本株代时最长，互补株居中，缺失株最快，说明ompH基因的缺失影响了P.multocida的生长。
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