从细菌/真菌对数生长曲线到降解率：微生物适应性与芳烃去除的相关性
2 结果与讨论
2.1 微生物生长动态
2.1.1 细菌的对数生长曲线
图1（上）为0~60 h内处理Ⅰ（外源细菌）、Ⅲ（外源细菌+真菌）和Ⅳ（土壤混合菌）中细菌的对数生长曲线。与处理Ⅰ和Ⅲ相比，处理Ⅳ中细菌的对数生长曲线具有明显的延迟期、对数增长期和稳定期：其中0~8 h为延迟期；8~24 h为对数增长期；24~48 h出现一段稳定期，48 h~60 h细菌生长呈轻度上升，进入一个新的增长阶段。这可能是由于细菌由消耗基础培养基中的碳源，转为以柴油中较易利用的烃类为碳源的结果。对数生长曲线说明本实验所提供的营养和环境条件对土壤细菌的生长繁殖十分适宜。
由图1（上）可见，处理Ⅰ、Ⅲ的细菌对数生长曲线在0~60 h内体现的生长特征基本一致，这与两组处理初始接种量和接种菌株类型有关。两组处理菌株为相同的细菌菌株，接种量相同，与处理Ⅳ相比，本实验对Ⅰ、Ⅲ处理的初始接种量相对较大，基数较高，这些细菌生长的延迟期很可能在营养液培养期就已经提前发生，结果导致试验开始的初期细菌总数较大，延迟期特征不明显，对数增长期和稳定期的阶段特征也不明显。0~60 h内处理Ⅲ中细菌数量始终略高于处理Ⅰ（但两者间差异不显著），其原因可能是在营养条件充分时，由于真菌与细菌间的共生关系，从而促进了细菌的生长，混合菌种间的这种协同作用在生物降解中起到重要的作用。
2.1.2 细菌的对数生长曲线（0~100 d）
图1（下）为0~100 d处理Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ的细菌对数生长曲线。可见，60 h~10 d各组处理中细菌数量继续增长，在大约20 d时处理Ⅳ中细菌数量达到最高值，此后略有回落。40 d后在较高数量级上保持稳定至实验结束。处理Ⅰ、Ⅲ的细菌数量达到最高值的时间迟于处理Ⅳ，分别为40 d和30 d，此后在这一数量级上保持稳定生长至实验结束。三组处理细菌数量最高点出现时间的不同与各处理中细菌生长的微环境条件及起始阶段生长状况有关。处理Ⅳ中细菌在试验前期生长旺盛，又因为提供给微生物生长的营养是一定的，因此其最高点出现得最早。
在100 d的试验期内，处理Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ中细菌始终保持在较高的数量级下稳定生长，直到试验结束时仍未见衰亡期出现。这表明随着时间的延长，微生物对污染环境的适应性普遍增强，并能够利用矿物油作为能源维持生长。虽然处理Ⅳ中细菌总数在实验初期明显低于其他处理，但这些细菌很强的生长适应性使得它们最终与外源细菌在数量上达到了同一水平，这充分表现了土壤细菌较强的适应性特征。
2.1.3 真菌的对数生长曲线（0~60 h）
图2（上）为0~60 h处理Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ中真菌的对数生长曲线。0~20 h内，处理Ⅳ未稀释的原液中真菌菌落数检出值均<10个，20 h至实验结束均为0检出。这可能是由于土壤真菌群的初始基数过低，以及土壤细菌的竞争等原因导致真菌种群无法维持增长。一般来说，真菌的生长和适应性不及细菌，生长延迟期较长。Ⅱ、Ⅲ处理中真菌的生长状况为：0~12 h内维持初始水平，12~16 h出现下降，16 h后逐渐回升，此后维持波动性缓慢上升状态。Ⅱ中外源真菌的数量总体高于Ⅲ，说明在污染状态下真菌和细菌混合培养对真菌生长有抑制作用，这可能与外源细菌的营养竞争有关。这与上述细菌生长情况不同，由此可知，外源细菌与真菌间是一种偏利共生的关系。
2.1.4 真菌的对数生长曲线（0~100 d）
由图2（下）可见，Ⅲ中真菌的数量经过实验初期的增长上下波动后，20 d~55 d逐渐回升，此后再次出现波动，但始终保持在同一数量级水平直至实验结束。Ⅱ中真菌数量经过实验初期较快的增长和短期下降后，从10 d起大幅增长，至40 d出现最高值，在数量上明显高于处理Ⅲ。40 d后处理Ⅱ中真菌数量开始下降直至60 d时停止，并在这一数量级上保持至实验结束。Ⅱ中真菌数量在40 d的明显下降很可能与营养的转型有关，由于处理Ⅱ中为单一真菌，无外来食物竞争者，真菌首先利用营养液中的可溶性营养组分，当这些组分被逐渐耗尽时，加入的矿物油组分成为替代碳源，但其对污染物的利用需要一个适应过程，这个过程可能对真菌整体的生长产生一些影响，并在真菌数量上有所体现。而处理Ⅲ一开始就与共存的细菌产生营养竞争，这一过程很可能使它们较早地去利用其他物质维持自身的生长，这两种情况在真菌的生长曲线上得到反映。
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