瑞香狼毒叶（断肠草）对金黄色葡萄球菌和石膏样毛癣菌生长曲线的影响——结果、讨论
2结果
2.1乙醇粗提物的抑菌活性
结果见表1，2。从表1和表2可以看出瑞香狼毒叶95%乙醇提取物和无水乙醇提取物对金黄色葡萄球菌和石膏样毛癣菌都有抑菌作用，95%乙醇提取物抑菌效果明显强于无水乙醇提取物，对金黄色葡萄球菌的抑菌效果略强于石膏样毛癣菌。当提取物浓度为100 mg·mL-1时，95%乙醇提取物抑菌圈高达12.8 mm。且随着提取物浓度的增加两种提取物抑菌效果也增加。所以选择95%乙醇提取物作为下一步提取分离活性成分的起始物。
表1 95%乙醇和无水乙醇提取物对金黄色葡萄球菌和石膏样毛癣菌的抑菌圈直径
表中数据为抑菌圈直径，0.00表示没有抑菌圈形成，滤纸片直径为6.00 mm
2.2 MIC和MBC
结果见表2。表3可以看出4种萃取物对2种皮肤菌都有不同程度的抑菌和杀菌效果，二氯甲烷萃取物抑菌和杀菌活性最高，其次是丙酮萃取物、甲醇萃取物，石油醚萃取物。二氯甲烷萃取物对金黄色葡萄球菌的MIC和MBC值为0.25 mg·mL-1，对石膏样毛癣菌MIC和MBC值高达0.5 mg·mL-1。所以实验选择二氯甲烷萃取物样品作为抑菌机制研究的样品。
表2 4种萃取物对金黄色葡萄球菌和石膏毛癣菌的MIC、MBC
2.3镜检结果
结果见图1，2。图1A可以看出石膏样毛癣菌对照组菌丝分支均匀，节与节之间连接紧密，而图1B处理组的菌丝分支扭曲混乱，节与节之间间距大，许多还有脱节现象，顶端有异常分支及膨大。图2A可以看出金黄色葡萄球菌对照组菌外表光滑，呈球型串珠状，而图2B处理组中菌体间完全粘连在一起呈麻绳状，菌体扭曲变形呈现不规则形状，完全看不出是什么菌种。
2.4生长曲线
结果见图3，4。从图3中可以看出样品对金黄色葡萄球菌生长曲线影响非常明显，CK曲线6 h前是延滞期，6～14 h是指数期，14～20 h是稳定期，处理组没有达到正常的生长高峰，8 h后就进入衰亡期，从曲线可以推断药物主要抑制菌的指数期。图4中CK生长曲线显示3～7 d石膏样毛癣菌出现了快速生长，7 d以后缓慢生长处于稳定期，而药物处理后菌的生长速度明显减慢，对菌的每个生长期都有不同程度的抑制。
图3金黄色葡萄球菌生长曲线图
图4石膏样毛癣菌生长曲线图
3讨论
本文最初提取溶剂选择乙醇，因为乙醇是一种广谱性溶剂，溶解能力强，溶解范围广，同时在有机溶剂中它最便宜，毒性最低，安全性最高，所以选择乙醇作为最先的提取溶剂。萃取溶剂选择是参考有机溶剂的介电常数，石油醚(1.8)、二氯甲烷(9.08)、丙酮(20.7)、甲醇(32.7)，溶剂的极性跟介电常数成正比，因此选用极性差别大且覆盖极性范围广的这4种溶剂作为萃取溶剂。
药物处理后镜检发现真菌菌丝生长缓慢，生长明显受到抑制，菌丝层稀薄，菌丝粗细不均匀并且扭曲变形，节与节之间有断裂现象。对真菌生长曲线的观察，主要影响指数生长期，因此可以推测药物可能抑制真菌细胞分裂。具体抑制其中哪些物质还有待进一步研究。镜检发现细菌外形粗糙，菌体间粘连扭曲成麻绳状，细胞形态不规则，显著变形。而干扰细胞壁合成的药物常会引起细胞形态的显著变形，故推测药物可能阻止或干扰了细菌细胞壁的合成来达到抑菌效果。具体抑菌机制还需进一步研究证实。
实验结果证明，瑞香狼毒叶中含有抑皮肤菌的高活性成分，这些成分的极性与二氯甲烷相近，至于是单体化合物还是混合物还有待进一步提取分离。
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