25种天然植物精油对蓝莓致病菌生长曲线、抑制作用（一）
摘要：为降低蓝莓采后遭受病原菌侵染引起严重腐烂而带来的损失，本研究分离鉴定引起蓝莓果实腐烂的致病菌并开发绿色安全的病害防治措施。通过组织分离法从自然发病的蓝莓果实上获得4种致病菌，形态学和分子鉴定表明4种病原菌分别为皮落青霉（Penicillium crustosum）、塔宾曲霉（Aspergillus tubingensis）、链格孢菌（Alternaria alternata）和串珠镰刀菌（Fusarium verticillioides），致病力排序为皮落青霉＞塔宾曲霉＞链格孢菌＞串珠镰刀菌。考虑到串珠镰刀菌的致病性较弱，后续仅对其他3种致病菌进行生长发育条件分析。
结果表明，3种菌的最适生长温度在25～28℃之间，生长曲线的对数生长期均在66 h之内，孢子均在12 h之内萌发。进一步探究了25种天然植物精油对致病菌的体外作用效果，发现多数精油对皮落青霉和塔宾曲霉的生长均具有高效的抑制作用，其中2μL/mL的茉莉精油、丁香罗勒精油、山苍子精油和红景天精油体外能完全抑制4种菌的生长，2μL/mL的续断精油可抑制皮落青霉、塔宾曲霉和链格孢菌的生长，对串珠镰刀菌的抑菌率为97%。活体实验表明，山苍子精油和茉莉精油熏蒸能显著降低接种皮落青霉的蓝莓果实病害发生，山苍子精油作用效果优于茉莉精油，有望作为控制蓝莓贮藏病害的绿色替代措施。
蓝莓（Vaccinium corymbosum L.）果实口感酸甜细腻，富含花青素等抗氧化物质，具有较高的营养和经济价值。随着近年来人们对营养健康的追求，鲜食蓝莓的比例越来越高。但蓝莓果实质地柔软、果皮薄，且成熟期集中在夏季高温多雨季节，采后极易腐烂，货架期非常短，这极大限制了蓝莓果实的销售半径和降低了其经济价值。研究表明，采后致病菌侵染是导致蓝莓腐败损失的主要原因之一。Wang Fei等在加利福尼亚州蓝莓果实上分离出的致病菌有灰葡萄孢（Botrytis cinerea）和链格孢菌（Alternaria Nees）。Bell等也报道胶孢炭疽（Colletotrichum gloeosporioides Penz.）会引起蓝莓炭疽病。
Jiang Xiaoqian和刘春燕等也在四川产区蓝莓果实上分离到了青霉、镰刀菌和黑曲霉，其分别能够引起蓝莓发生青霉病、果腐病和黑霉病，其中黑曲霉的致病性最强。葛达娥等从江苏产区生产的蓝莓果实上分离得到稻黑孢霉、青霉属、枝孢属和链格孢属真菌致病菌，致病性实验确定链格孢霉为主要病原菌。因此，不同地区蓝莓果实优势致病菌存在差异，分离特定地区蓝莓果实的优势致病菌对于开发针对性的病害防治措施具有重要意义。
植物精油具有天然、低毒或无毒、广谱抑菌和环境友好等优点，被广泛用于新鲜果蔬的防腐保鲜。Yan Jia等发现山苍子精油对竹子上的绿木霉、桔青霉以及黑曲霉有较好的抑菌活性。Ji Yaru等发现牛至精油和丁香精油对灰葡萄孢和链格孢菌的抑制效果较好，且60μL/L牛至精油能增强蓝莓苯丙氨酸解氨酶、多酚氧化酶和过氧化物酶等抗病相关酶的活性，提高蓝莓果实抗病性。Chen Chuying等发现丁香精油含量在0.4%以上时柑橘发病率与对照组相比降低了40%左右，且精油处理后柑橘果实中的H2O2含量和抗病相关酶活性升高，诱发了柑橘果实抗性，导致柑橘果实中丙二醛含量降低。
Wang Hanbo等研究了0、50、100μmol/L茉莉酸甲酯处理对蓝莓果实中的防御物质（如抗坏血酸、谷胱甘肽）、抗氧化酶（如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、抗坏血酸过氧化物酶）以及H2O2的影响，发现茉莉酸甲酯提高了蓝莓果实中防御物质以及抗氧化酶的水平，且有效维持了蓝莓的果实品质。许晴晴也研究了100μmol/L香芹酚对蓝莓果实抗病性酶活力以及果实品质与营养物质的影响，证实了精油处理可以延缓果实的衰老，及时清除蓝莓果实体内的自由基，提高蓝莓果实抗病性，延长其货架期。尽管如此，植物精油在蓝莓采后病害上的研究仍然非常有限，探究更多植物精油的作用效果对于制定蓝莓果实病害防控措施具有一定指导意义。
基于此，本研究首先从自然发病的蓝莓果实分离引起蓝莓腐烂的优势致病菌，通过形态学和分子生物学鉴定其种类，并进一步探究25种天然植物精油对蓝莓致病菌的作用效果，以期为开发针对性的蓝莓保鲜技术提供理论参考。
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