忍冬提取液对酸土脂环酸芽孢杆菌生长曲线、细胞形态和生物膜形成能力的影响（一）
酸土脂环酸芽孢杆菌（Alicyclobacillus acidoterrestris）、单增李斯特菌（Listeria monocytogenes）和金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）等细菌在自然环境中广泛存在，是最常见的致病微生物，食用被这些细菌污染的食品后可能会引起呕吐和中毒等不良症状，所以在食品加工和储藏过程中常常要用化学防腐剂抑制有害微生物的生长。目前，工业生产中常用苯甲酸、柠檬酸和山梨酸等防腐剂，然而化学防腐剂乱用或滥用可能会对人体造成不同程度的危害。因此，迫切需要开发安全且有效的新型天然防腐剂。据文献报道，植物中存在促进人体健康且具有抑菌和杀菌作用的天然活性成分，如多酚、黄酮类和有机酸等。因此，寻找和利用有效抑菌成分含量丰富的植物具有重要意义。
忍冬（Lonicera japonica Thunb.）为忍冬科忍冬属半常绿藤木，其干燥花蕾或带初开的花为金银花。国内外研究证实，金银花、忍冬叶和忍冬藤均含有黄酮类、有机酸类、挥发油类和环烯醚萜类等多种天然活性成分，具有抗菌消炎、清热解毒、抗氧化、保肝利胆和降血糖等作用。Li等研究发现，金银花中的酚酸和黄酮类化合物等活性成分可在不同程度上抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌（Escherichia coli）和铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）。Rahman等研究了忍冬叶提取物和金银花精油对体外食源性细菌的抑菌作用，结果表明忍冬叶对金黄色葡萄球菌的抑菌活性更强。马艳妮等研究了忍冬叶总黄酮对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium）等9种常见病原菌的体外抑菌活性，结果表明忍冬叶总黄酮具有较好的抗菌活性。但忍冬在抑制酸土脂环酸芽孢杆菌作用等抑菌活性方面鲜有报道。
忍冬叶和忍冬藤的产量远高于金银花。然而，目前对忍冬叶和忍冬藤的开发利用较少。因此，研究忍冬不同部位生物活性成分及功能特性，对提高忍冬的综合利用价值具有重要意义。本文以金银花、忍冬叶和忍冬藤为原料，研究忍冬不同部位生物活性成分及对12株供试菌的体外抑菌活性，并测定对抑制酸土脂环酸芽孢杆菌效果较强的金银花和忍冬叶提取液的最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）以及对金银花和忍冬叶提取液对酸土脂环酸芽孢杆菌生长曲线、细胞形态和生物膜形成能力的影响进行研究。本研究为进一步开发利用忍冬，开发新型食品抑菌剂提供参考。
1.材料与方法
1.1材料与仪器
金银花、忍冬叶和忍冬藤来自河南省新乡市河南科技学院金银花试验基地；嗜酸乳杆菌（L.acidophilus zrx02 GenBank No.MF804413）、植物乳杆菌（L.plantarum zrx03 GenBank No.MN784485）、鼠李糖乳杆菌（L.rhamnosus zrx01 GenBank No.KY348290、酸土脂环酸芽孢杆菌（A.acidoterrestris DSM 3922T）、无乳链球菌（S.agalactiae CICC 10465）、单增李斯特氏菌（L.monocytogenes CICC 21633）、金黄色葡萄球菌（S.aureus ATCC 25923）、枯草芽孢杆菌（B.subtilis CICC 10002）、大肠杆菌（E.coli JM109 ATCC 67387）、沙门氏杆菌（Salmonella CMCC 541）、空肠弯曲杆菌（C.jejuni CICC 22936）、马克斯克鲁维酵母（K.marxianus）均为河南科技学院食品研究所保藏菌株；MRS肉汤培养基、AAM培养基、BHI培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、LB培养基、布氏肉汤培养基、YPD培养基青岛高科技工业园区海博生物技术有限公司；没食子酸成都曼斯特有限公司；芦丁、福林酚、结晶紫北京索莱宝有限公司；绿原酸美国Sigma-Aldrich公司；戊二醛天津市科密欧化学试剂有限公司；甲酸、甲醇色谱纯，西陇科学股份有限公司；其他试剂均为分析纯。
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