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微生物计数:从显微镜视野法到µCount3D微生物立体计数仪的转换

来源: 发布时间:2025-08-25 18:44:42 浏览:16 次

本转换旨在将传统、手动操作的显微镜视野法(如血球计数板法)微生物计数,升级为使用丹麦BioSense公司µCount3D微生物立体计数仪的自动化、高通量计数方法。核心转变在于利用一次性计数板(如C-Chip™)和仪器的自动数字成像分析技术替代人工镜检和计数。


关键转换步骤与变化:


1.操作流程简化:


旧法:清洁计数板/盖片->精确加样/盖片->手动镜检、寻找视野->人工计数特定方格->公式计算浓度->清洁。


新法(µCount3D):混匀样本->吸取固定体积样本->滴加至计数板加样口->插入仪器->启动自动检测(自动吸入、填充、3D扫描、分析、计算)->读取/导出结果->丢弃计数板。步骤显著减少,操作更简便。


2.计数原理升级:


旧法:依赖人眼在二维平面上识别和计数特定区域细胞,易受主观性、疲劳、细胞重叠和聚焦问题影响。


新法(µCount3D):仪器自动进行多焦平面快速扫描,构建样本的3D图像信息,并由专用软件自动识别和计数整个计数腔内的细胞/颗粒,准确性、重现性更高,减少人为误差。


3.数据输出与管理:


旧法:手动记录原始数据,人工计算浓度,易出错,数据管理不便。


新法(µCount3D):软件自动计算并显示浓度(cells/mL)、总细胞数、活力(如适用),结果可直接屏幕查看、导出报告(PDF,Excel,CSV)或存储,便于追溯、管理和共享。


4.耗材与维护:


旧法:使用可清洗的血球计数板和盖玻片(需小心操作避免损坏或污染)。


新法(µCount3D):使用一次性计数板,无需清洗,避免交叉污染,但产生耗材成本。仪器本身需定期维护。

核心优势:


高效快速:单次检测仅需数十秒至一分钟,大幅提升通量。


准确客观:3D成像和自动分析减少人为误差和主观性。


操作简便:流程自动化,降低操作者技能要求和疲劳。


数据电子化:结果自动生成并存储,便于管理和追溯。


无清洗:使用一次性耗材,省去清洗步骤和污染风险。


注意事项:


需确保样本浓度在计数板线性范围内(通常需适当稀释)。


样本应避免含过多碎片、气泡或过于粘稠。


需考虑一次性计数板的耗材成本。


建议转换初期进行新旧方法并行测试以验证结果一致性。


总结:转换为µCount3D计数仪实现了微生物计数过程的自动化、数字化和标准化,显著提高了效率、准确性和数据管理水平,是现代实验室替代传统显微镜计数法的理想选择。

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