基于oCelloScope快速检测的尘肺下呼吸道感染病原菌药敏特征研究
摘要
目的 了解尘肺并发下呼吸道感染患者的病原菌分布以及对常用抗生素的耐药情况。方法 收集2020年4月1日~2022年12月31日湖南省职业病防治院尘肺病并疑似下呼吸道感染住院患者的下呼吸道标本，采用丹麦Biosense公司oCelloScope微生物快速药敏监测系统（微生物生长曲线分析系统）进行细菌快速鉴定及药敏实验，通过实时监测微生物生长曲线分析病原菌分布和药敏试验结果。结果 从17 468例标本中检出病原菌1 366株，检出率7.82%，主要以革兰氏阴性杆菌为主，占86.42%(1 180/1 366)，其中排在前三位的是肺炎克雷伯菌(42.24%)、流感嗜血杆菌(20.86%)和铜绿假单胞菌(9.52%)；革兰氏阴性球菌检出率为7.47%(102/1 366)，全部为卡他莫拉菌；革兰氏阳性球菌检出率6.15%(84/1 366)，其中主要是肺炎链球菌(4.83%，66/1 366)。不同分期尘肺患者下呼吸道前三位的检出菌与总体情况类似。基于oCelloScope生长曲线分析，肺炎克雷伯菌、流感嗜血杆菌、铜绿假单胞菌及卡他莫拉菌对头孢菌素、头孢菌素及酶抑制剂合剂、喹诺酮类和碳青霉烯类药物的耐药率≤10.0%；没有检出耐利奈唑胺或万古霉素的肺炎链球菌，对青霉素的耐药率为3.03%，对红霉素及克林霉素的耐药率>90%。结论 湖南地区尘肺并发下呼吸道感染患者的病原菌以革兰氏阴性杆菌为主，对头孢菌素、头孢菌素及酶抑制剂合剂、喹诺酮类和碳青霉烯类药物比较敏感；而检出革兰氏阳性球菌以肺炎链球菌为主，对青霉素、利奈唑胺或万古霉素很敏感；临床可根据患者具体情况选择相对应药物。
尘肺病是我国职业病中数量最多、危害最严重的主要病种。尘肺病占职业病的90%，尘肺病也是煤炭行业最为严重的职业病。尘肺病患者一般需要进行较长时间的住院治疗，再加上自身抵抗力下降等原因，导致呼吸道的防御能力下降，容易并发其他细菌感染而引起下呼吸道的感染。主要临床表现为咳嗽、咳痰、发热、胸闷气短等。本研究拟采用先进的微生物快速检测技术分析尘肺患者下呼吸道感染病原菌分布以及常见抗生素的耐药情况，以期为临床医生治疗尘肺病患者下呼吸道的感染提供快速、准确的经验用药依据。
1 材料与方法
1.1 研究对象
收集2020年4月1日~2022年12月31日在湖南省职业病防治院根据我国尘肺病诊断标准(GBZ70-2009)已确诊为尘肺病并疑似下呼吸道感染的17 468例患者资料。排除标准：①并发免疫系统疾病、肝肾脏疾病、血液系统疾病及恶性肿瘤者；②并发其他炎症性疾病；③存在精神病史者；④临床资料不完整者。其中尘肺一期4 192例，尘肺二期3 842例，尘肺三期7 387例，未分期2 047例；男性患者17 393例(占99.57%)，女性患者75例(占0.43%)，年龄22~94岁。
1.2 仪器与试剂
丹麦Biosense公司oCelloScope微生物快速药敏监测系统（微生物生长曲线分析系统），该系统基于自动显微镜成像和图像分析技术，可实时监测微生物生长动力学。配套专用微生物检测板、液体培养基及标准化抗生素药敏板。质控菌株：肺炎克雷伯菌(ATCC700603)、大肠埃希菌(ATCC25922)、流感嗜血杆菌(ATCC49247)和金黄色葡萄球菌(ATCC29213)购自卫生部临床检验中心。
1.3 方法
1.3.1 标本处理与快速检测
将患者送检的痰或者肺泡灌洗液标本(痰镜检合格标准：白细胞:鳞状上皮细胞≥2.5:1)进行标准化前处理，采用oCelloScope系统专用处理流程。标本无需传统平板培养，直接接种于oCelloScope专用检测板中，该系统通过自动显微镜连续成像，实时监测微生物生长曲线，可在4-8小时内完成细菌快速鉴定和药敏实验。
1.3.2 快速药敏实验
运用oCelloScope系统进行快速药敏实验。将处理后的标本接种于含不同浓度抗生素的药敏板中，系统自动监测各孔微生物生长动力学曲线。通过分析生长曲线参数（延迟期、对数生长期斜率、最大生物量等），系统自动计算最小抑菌浓度(MIC)并判定药敏结果。所有药敏结果判读均参照美国临床实验室标准化研究所2022年CLSI(M100-S32)版，系统软件自动生成标准化报告。
1.4 统计学分析
运用WHONET 5.6软件对oCelloScope系统检测的细菌鉴定及药敏结果进行统计分析，结合系统自动生成的生长曲线数据分析病原菌分布特征和耐药模式。